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瀏覽 1710次發(fā)布時間:2024-05-04?
新手病毒純化中peg6000沉淀不能溶解,求教
peg8000溶液直接水溶解
溶解性口訣
鉀鈉銨鹽溶水快 ,①
硫酸鹽除鋇鉛鈣.②
氯化物溶氯化銀,
硝酸鹽溶液都透明.③
口訣未皆沉.④
溶解性口訣二
鉀、鈉、銨鹽、硝酸鹽;
氯化物除銀、亞汞;
硫酸鹽除鋇鉛;
碳酸、磷酸鹽,溶鉀、鈉、銨.
溶解性口訣三
鉀鈉銨硝皆溶、鹽酸鹽溶銀亞汞;
硫酸鹽溶鋇鉛、碳磷酸鹽溶.
數(shù)酸溶堿少溶、鉀鈉銨鋇溶
溶解性口訣四
鉀、鈉、硝酸溶,(鉀鹽、鈉鹽硝酸鹽都溶于水.)
鹽酸除銀(亞)汞,(鹽酸鹽除氯化銀氯化亞汞外都溶.)
再說硫酸鹽,容鋇、鉛,(硫酸鹽溶硫酸鋇硫酸鉛.)
其余幾類鹽,(碳酸鹽、亞硫酸鹽、磷酸鹽、硅酸鹽硫化物)
溶鉀、鈉、銨,(相應(yīng)鉀鹽、鈉鹽銨鹽溶)
說堿類,鉀、鈉、銨鋇.(氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋇氨水溶)
另幾種微溶物,單獨記住.
溶解性口訣五
鉀鈉銨鹽硝酸鹽
完全溶解困難
氯化亞汞氯化銀
硫酸鋇硫酸鉛
沉淀記間
氫硫酸鹽堿類
碳酸磷酸硝酸鹽
溶鉀鈉銨
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病毒濃縮方法有哪些?哪種方法病毒蛋白損失少?
PEG6000沉淀結(jié)合差速離心
蔗糖沉淀
超速離心
具體看病毒大小和密度,改進試劑的濃度,我也在找
如何使用超速離心機濃縮慢病毒
你好,慢病毒轉(zhuǎn)染細胞的操作步驟如下:
1、慢病毒轉(zhuǎn)染前18-24小時,將貼壁細胞以1×10^5/孔鋪到24孔板中。使細胞在慢病毒轉(zhuǎn)染時的數(shù)量為2×10^5/孔左右。
2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鮮培養(yǎng)基替換原培養(yǎng)基,加入適量病毒懸液。37℃孵育。
3、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時后加入2ml新鮮培養(yǎng)基以稀釋polybrene。
4、繼續(xù)培養(yǎng)24小時,用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基。
5、繼續(xù)培養(yǎng)。如果慢病毒含有熒光蛋白,一般轉(zhuǎn)染48小時后可見明顯熒光表達,72小時后更加明顯。如需FACS檢測轉(zhuǎn)染效率,可在轉(zhuǎn)染后72-96小時進行。如果慢病毒含有抗性基因并且需要加藥篩選,可以在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥。
二、慢病毒轉(zhuǎn)染懸浮細胞實驗方法
1、在2×10^5/ml懸浮細胞中加入polybrene至6 μg/ml和適量病毒,充分混勻。37℃孵育。或者150g室溫離心4小時(選作,部分難轉(zhuǎn)染的細胞系采用此步驟可以提高轉(zhuǎn)染效率)。
2、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時后(或離心結(jié)束后)加入等體積新鮮培養(yǎng)基以稀釋polybrene。
3、繼續(xù)培養(yǎng)3-4天。中間視細胞生長情況可傳代或換液。
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感染了PE病毒怎么辦
殺毒
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